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你知道熒光定量PCR的應(yīng)用嗎？

熒光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，通過(guò)對(duì)擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)產(chǎn)物熒光信號(hào)的實(shí)時(shí)檢測(cè),最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。那么你知道熒光定量PCR的應(yīng)用嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、分子生物學(xué)研究1.核酸定量分析：對(duì)傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測(cè),比如近期流行的甲型H1N1流感，轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物基因拷貝數(shù)的檢測(cè)，RNAi基因失活率的檢測(cè)等。2.基因表達(dá)差異分析：比較經(jīng)過(guò)不同處理樣本之間特定基因的表達(dá)差...

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你知道細(xì)胞凍存的原理和實(shí)驗(yàn)步驟嗎？

細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常用技術(shù)。那么你知道細(xì)胞凍存的原理和實(shí)驗(yàn)步驟嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！原理：將細(xì)胞放在-196℃液氮中，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)，減少細(xì)胞代謝，理論上儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。最佳的冷凍條件是盡可能地降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成，減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對(duì)細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷。上述要求可通過(guò)下列方法獲得：1.緩慢冷凍，使細(xì)胞內(nèi)水分離開細(xì)胞，但不可太慢，以避免冰晶形成；2.用親水的低溫保護(hù)劑排除水分；3.在盡可能低的溫度下保存細(xì)胞，降低高濃度鹽對(duì)冰中蛋白質(zhì)變性的...

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細(xì)胞凍存有何注意事項(xiàng)？

細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常用技術(shù)。原理是將細(xì)胞放在-196℃液氮中，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)，減少細(xì)胞代謝，理論上儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。那么細(xì)胞凍存有何注意事項(xiàng)呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、DMS0稀釋時(shí)會(huì)釋放大量熱量，不能直接加到細(xì)胞液中，須事先配制，且DMSO必須是細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別的；二、緩慢冷凍，細(xì)胞逐步脫水，不會(huì)因產(chǎn)生大的冰晶而受到損害；三、選擇細(xì)胞生長(zhǎng)良好、密度約為80-90%、活力達(dá)90%以上的細(xì)胞凍存；四、凍存時(shí)細(xì)胞密度少于5X105個(gè)活細(xì)胞/mL時(shí)，很難成功復(fù)蘇；五、...

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如何區(qū)分各種PCR技術(shù)？

PCR是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，PCR技術(shù)有很多，那么我們應(yīng)該如何區(qū)分各種PCR技術(shù)呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、普通PCRPCR是普通PCR，以雙鏈DNA為模板，以dNTP為底物，特異性地?cái)U(kuò)增雙鏈DNA。然后采用瓊脂糖凝膠電泳對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，只能做定性分析。二、實(shí)時(shí)熒光定量PCRqPCR和Real-timePCR是實(shí)時(shí)熒光定量PCR，以cDNA為模板，以dNTP為底物，對(duì)擴(kuò)增出的DNA進(jìn)行定量分析。實(shí)時(shí)熒光定量PCR常用的方法：水解探針法和熒光染料法...

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細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的常見問(wèn)題有哪些？如何解決呢？

細(xì)胞培養(yǎng)做為生物學(xué)研究最基礎(chǔ)的技術(shù)之一，可以說(shuō)是滲透科研界的方方面面。那么細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的常見問(wèn)題有哪些？應(yīng)該如何解決呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、如何選用細(xì)胞系培養(yǎng)基？?jī)?yōu)先根據(jù)細(xì)胞來(lái)源公司提供的培養(yǎng)條件，。一般建議不要隨意更換培養(yǎng)基種類。細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用與原先提供的培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基，可能造成細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化或無(wú)法存活，以及細(xì)胞的表型功能丟失。二、細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí)，應(yīng)如何處理？直接丟棄或更換，將未受污染的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至其它培養(yǎng)箱，并用消毒劑消...

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