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流式細(xì)胞周期檢測(cè)的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些？

你知道流式細(xì)胞周期檢測(cè)的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、樣本制備注意事項(xiàng)1.根據(jù)不同的檢測(cè)細(xì)胞調(diào)整合適的溫度、濕度、酸堿度等培養(yǎng)環(huán)境，注意一定要無(wú)菌的環(huán)境培養(yǎng)。2.培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，以對(duì)數(shù)期處理為宜，避免細(xì)胞量過(guò)少導(dǎo)致收集細(xì)胞量不足或者細(xì)胞量過(guò)多導(dǎo)致細(xì)胞開(kāi)始大量死亡造成的實(shí)驗(yàn)誤差。3.流式檢測(cè)細(xì)胞周期上機(jī)檢測(cè)所需收集細(xì)胞量較多，收集細(xì)胞時(shí)盡量多收集一些4.流式檢測(cè)對(duì)細(xì)胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動(dòng)作輕緩，避免過(guò)多地?fù)p傷、弄破細(xì)胞。5.本實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動(dòng)作...

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【干貨】一文了解vero細(xì)胞培養(yǎng)全流程

Vero細(xì)胞系是連續(xù)非整倍體細(xì)胞，連續(xù)細(xì)胞系可以經(jīng)過(guò)多次分裂而不衰老，非整倍體是指細(xì)胞中的染色體數(shù)目與通常的不同。與其它普通哺乳動(dòng)物細(xì)胞不同，Vero細(xì)胞還有干擾素分泌缺陷的特點(diǎn)，當(dāng)被病毒感染時(shí)，它不能分泌干擾素，但它仍然具有α/β-干擾素的受體，所以對(duì)于其它來(lái)源的干擾素仍有正常的反應(yīng)。一、基本信息細(xì)胞名稱(chēng)：Vero非洲綠猴腎細(xì)胞細(xì)胞別稱(chēng)：VERO;Verdareno細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)組織來(lái)源：正常腎培養(yǎng)基：MEM+10%FBS+1%PS生長(zhǎng)條件：①氣相：...

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原代細(xì)胞培養(yǎng)的分離注意事項(xiàng)有什么？

分離是原代細(xì)胞培養(yǎng)的重要步驟之一，那么你知道原代細(xì)胞培養(yǎng)的分離注意事項(xiàng)有什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、組織塊培養(yǎng)法1.組織塊接種后的前3天，在觀察和移動(dòng)的過(guò)程中，注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動(dòng)和振動(dòng)，否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會(huì)脫落飄起。2.加入的培養(yǎng)液不宜過(guò)多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動(dòng)而脫落下來(lái)。3.當(dāng)細(xì)胞向外遷徙出來(lái)后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細(xì)胞，它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會(huì)影響原代細(xì)胞的生長(zhǎng)。4.為促進(jìn)組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶皿上，可以在種植前...

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原代細(xì)胞取材的注意事項(xiàng)有哪些？

取材作為原代細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中至關(guān)重要的一步，那么原代細(xì)胞取材的注意事項(xiàng)有哪些呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、皮膚和粘膜主要取皮片，面積一般2~4平方厘米。二、內(nèi)臟和實(shí)體瘤1.無(wú)菌環(huán)境；2.熟悉所需組織的類(lèi)型和部位；3.要避開(kāi)破潰、壞死液化部分，以防污染，盡量去除混雜的結(jié)締組織。三、血液細(xì)胞一般多抽取靜脈外周血，或從淋巴組織中(如脾、扁桃體、胸腺、淋巴結(jié)等)分離細(xì)胞，取材時(shí)應(yīng)注意抗凝。四、骨髓、羊水、胸/腹水細(xì)胞嚴(yán)格無(wú)菌，注意抗凝，還要盡快分離培養(yǎng)，離心后，用無(wú)鈣、鎂PBS洗兩次，再...

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WB實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題有哪些？如何解決？

WesternBlot雖是實(shí)驗(yàn)室zui常用的蛋白分析技術(shù)，但是由于它步驟繁瑣、操作流程長(zhǎng)、影響因素多，所以導(dǎo)致在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中會(huì)遇到各式各樣的問(wèn)題，那么你知道WB實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題有哪些呢？該如何解決呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、目標(biāo)條帶沒(méi)有信號(hào)原因分析：1.樣品中可能含有蛋白酶，使蛋白樣品分解成小分子。2.目標(biāo)蛋白濃度過(guò)低（低于檢測(cè)下線）。3.轉(zhuǎn)膜時(shí)間太短導(dǎo)致目標(biāo)蛋白沒(méi)有充分轉(zhuǎn)移到膜上，或者轉(zhuǎn)膜時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致樣品轉(zhuǎn)穿。4.一抗的特異性不佳，導(dǎo)致一抗無(wú)法識(shí)別目標(biāo)蛋白。解決方法：1.添加蛋白...

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